
蛋白質相互作用分析技術實現無標記實時檢測
內容簡介:
本文系統介紹Bio-Rad ProteOn XPR36蛋白相互作用陣列系統在分子互作研究中的技術優勢。詳細解析其表面等離子體共振(SPR)檢測原理、多通道并行分析能力和動力學參數測定精度,展示其在藥物篩選和通路研究中的應用價值。
正文:
表面等離子體共振技術無需標記即可實時監測分子間相互作用。Bio-Rad ProteOn XPR36系統采用創新性的交叉通道設計,可同時分析36對相互作用,大大提高了檢測通量。
在傳感器芯片設計方面,系統使用納米級金膜傳感器,SPR角分辨率達0.0001度,對應質量靈敏度為1pg/mm2。微流體系統采用層流技術,樣品消耗量僅需50μL,流速控制精度±0.25%。溫控系統精度達±0.005℃,確保動力學測量的準確性。
在動力學分析方面,系統可實時監測結合和解離過程,自動計算結合速率常數(ka)、解離速率常數(kd)和平衡解離常數(KD)。檢測范圍涵蓋高速結合(ka>106 M-1s-1)到高親和力結合(KD<1pM)。數據質量指標Rmax值誤差<5%,χ2值<2,符合高質量數據標準。
應用研究顯示,在抗體藥物篩選中,系統可在6小時內完成36種候選分子的親和力測定,KD值測定精度達±10%。在信號通路研究中,可同時分析多個蛋白質的相互作用網絡,為系統生物學研究提供重要工具。
關鍵詞: 表面等離子體共振、蛋白質相互作用、無標記檢測、動力學分析、高通量篩選