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CS401--SDS-PAGE 變性蛋白上樣緩沖液技術(shù)解析

更新時(shí)間:2025-08-26      點(diǎn)擊次數(shù):169
在蛋白質(zhì)研究中,SDS - PAGE(十二烷基硫酸鈉 - 聚丙烯酰胺凝膠電泳)是分離和分析蛋白質(zhì)的經(jīng)典技術(shù),而 CS401--SDS-PAGE 變性蛋白上樣緩沖液作為該技術(shù)的重要組成部分,其性能直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。下面將從產(chǎn)品組成、作用機(jī)制、技術(shù)特點(diǎn)和應(yīng)用場景等方面對 CS401 上樣緩沖液進(jìn)行詳細(xì)介紹。
產(chǎn)品組成與特性
CS401--SDS-PAGE 變性蛋白上樣緩沖液主要由 SDS、β - 巰基乙醇、甘油、Tris - HCl(pH6.8)和溴酚藍(lán)等成分組成。各成分在蛋白質(zhì)變性、樣品處理及電泳監(jiān)測中發(fā)揮著的作用。
  • SDS:作為陰離子去污劑,SDS 能與蛋白質(zhì)分子充分結(jié)合,使蛋白質(zhì)變性并帶上大量負(fù)電荷。其與蛋白質(zhì)的結(jié)合比例約為 1.4g SDS/g 蛋白質(zhì),這種強(qiáng)結(jié)合能力確保蛋白質(zhì)解聚為亞基,并均勻地分布在溶液中,消除了蛋白質(zhì)本身電荷和空間結(jié)構(gòu)對遷移率的影響,使得蛋白質(zhì)在電泳中的遷移僅取決于其分子量大小。

  • β - 巰基乙醇:具有強(qiáng)還原性,可切斷蛋白質(zhì)分子中的二硫鍵,使蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)被破壞,充分伸展為線性分子。這一過程不僅有助于 SDS 與蛋白質(zhì)的結(jié)合,還能進(jìn)一步保證蛋白質(zhì)在電泳過程中按分子量大小進(jìn)行分離,提高電泳的分辨率。

  • 甘油:能增加樣品的密度,使加入的樣品能夠沉入加樣孔底部,避免樣品在電泳緩沖液中擴(kuò)散,保證樣品在凝膠中的起始位置一致,從而提高電泳結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。

  • Tris - HCl(pH6.8):維持緩沖液的 pH 穩(wěn)定,為蛋白質(zhì)變性提供適宜的酸堿環(huán)境。穩(wěn)定的 pH 值對于 SDS 與蛋白質(zhì)的結(jié)合以及蛋白質(zhì)的變性過程至關(guān)重要,能確保實(shí)驗(yàn)條件的一致性,減少因 pH 波動(dòng)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。

  • 溴酚藍(lán):作為指示劑,溴酚藍(lán)在電泳過程中隨蛋白質(zhì)一同遷移,其遷移速度比大多數(shù)蛋白質(zhì)快,通過觀察溴酚藍(lán)的位置,科研人員可以大致判斷電泳的進(jìn)程,方便控制電泳時(shí)間,避免過度電泳或電泳時(shí)間不足對結(jié)果造成影響。

作用機(jī)制
將蛋白質(zhì)樣品與 CS401 上樣緩沖液混合后,需在高溫(通常為 95 - 100℃)條件下加熱 3 - 5 分鐘。在這一過程中,SDS 迅速與蛋白質(zhì)結(jié)合,使蛋白質(zhì)分子解聚并帶上負(fù)電荷;β - 巰基乙醇切斷二硫鍵,使蛋白質(zhì)變性為線性分子;甘油增加樣品密度,使其順利沉入加樣孔;Tris - HCl 維持體系的 pH 穩(wěn)定;溴酚藍(lán)均勻分布在樣品中,為電泳監(jiān)測提供指示。經(jīng)過處理的樣品,其蛋白質(zhì)分子在電泳過程中,因僅受分子量大小影響,在聚丙烯酰胺凝膠的分子篩作用下,按照分子量從大到小的順序進(jìn)行分離,最終在凝膠上形成清晰、可辨的條帶。
技術(shù)優(yōu)勢
穩(wěn)定可靠的性能
CS401 上樣緩沖液經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)流程,各成分比例精準(zhǔn),保證了產(chǎn)品批次間的穩(wěn)定性。無論是小規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室研究,還是大規(guī)模的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,都能為實(shí)驗(yàn)提供可靠的保障,使不同實(shí)驗(yàn)人員在不同時(shí)間的實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有良好的重復(fù)性和可比性。
廣泛的適用性
該上樣緩沖液適用于多種來源和性質(zhì)的蛋白質(zhì)樣品,包括動(dòng)物組織、植物組織、微生物細(xì)胞等提取的蛋白質(zhì),以及重組表達(dá)的蛋白質(zhì)。同時(shí),兼容不同濃度和類型的蛋白質(zhì)樣品,無論是低豐度蛋白質(zhì)的檢測,還是高濃度蛋白質(zhì)的分離,都能發(fā)揮良好的作用,滿足科研人員在不同研究方向和實(shí)驗(yàn)階段的需求。
便捷的操作體驗(yàn)
CS401 上樣緩沖液采用即用型設(shè)計(jì),科研人員無需自行配制各成分,只需按照一定比例將其與蛋白質(zhì)樣品混合,經(jīng)過簡單的加熱處理,即可直接上樣進(jìn)行 SDS - PAGE 電泳。這種便捷的操作方式,不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,還降低了因自行配制緩沖液可能出現(xiàn)的誤差風(fēng)險(xiǎn),提高了實(shí)驗(yàn)效率。
應(yīng)用場景
CS401--SDS-PAGE 變性蛋白上樣緩沖液在蛋白質(zhì)研究的多個(gè)領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用。在蛋白質(zhì)純度檢測中,可幫助科研人員清晰分辨蛋白質(zhì)樣品中的雜質(zhì),判斷樣品的純度;在蛋白質(zhì)分子量測定實(shí)驗(yàn)中,通過與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)分子量 Marker 對比,準(zhǔn)確確定目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量;在蛋白質(zhì)表達(dá)水平分析方面,可對不同處理?xiàng)l件下的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行分離和比較,直觀反映蛋白質(zhì)表達(dá)量的變化;此外,在蛋白質(zhì)相互作用研究、蛋白質(zhì)修飾分析等領(lǐng)域,也是的實(shí)驗(yàn)試劑,為深入探索蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能提供有力支持。



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